脱分化CDedifferentiationD 亦称“去分化"。已分化 的组织在适当的培养条件下恢复细胞分裂活性,从已分化 的状态转变为分生状态的过程。愈伤组织即为典型的脱分 化组织。脱分化的组织或细胞在一定的条件下可有转变为 各种不同细胞类型的能力。在脱分化和再分化的过程中,细 胞的全能性得以表达。细胞的脱分化、再分化的过程可以在 不同程度上和层次上得以表现,这些表现形式包括离体细 胞的分化、器官发生、体细胞胚胎发生及其植株再生的过 程。

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去分化 CDedifferentiationJ 即“脱分化"。

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再分化CRedifferentiationD 脱分化的植物组织在一 定条件下重新进入分化期,分化出不同类型的细胞、组织和 器官,最终长成完整植株的过程。茶树外植体,脱分化后形 成的愈伤组织就具有再分化能力。组织培养中再分化形成 的细胞类型有管胞、色素细胞、石细胞、纤维细胞、毛状细 胞及细胞丝状体等。常见的组织分化发生在维管组织。在适 宜的条件下出现器官分化,器官的种类有根、叶、芽等,还 有类似于从受精卵发育成的胚胎结构——胚状体。

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培养基CCulture medium^ 人工配制的适合植物组织 或细胞分化和生长的营养基质。具体成分根据植物种类对 营养需要而不同。组织培养在大多数情况下是异养生长,除 每种植物必需的矿质营养物(大量和微量元素)外,还必须 供给作为能源的糖类以及微量的维生素和激素。此外有时 还需要某些有机氮化合物、有机酸和复杂的天然物质。按加 入或不加入凝固剂(如琼脂等)可分为固体培养基、半固体 培养基和液体培养基。

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组织培养CTissue cultured 人工培养植物组织的方 法。在无菌条件下,将外植体移植在含有营养成分的培养基 内,并放置在控光控温的培养室中,以诱导分化和生长成 株。如果培养的对象是离体的细胞,则称细胞培养。在培养 过程中,如给予各种能够引起细胞或组织发生变化的条件, 则可获得发生变化的过程和成因。组织和细胞培养的理论 基础是建立在细胞全能性的概念上。植物细胞是在生理上、 发育上具有潜在性的全能单位。组织培养在微体繁殖、无病 毒植株的获得、次生物质的产生、新品种的创造和种质资源 保存等方面具有广阔

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细胞培养CCell cultured 见"组织培养"。

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器宫培养COrgan cultured以茶树离体器官培养成株 的方法。在无菌条件下,将离体的茶树器官移植在含有适当 营养成分的培养基内,并置于适宜温度和光照等条件下,以 诱导其形态建成或恢复其分裂能力。已能培养成完整植株 的茶树器官有子叶、成熟胚、未成熟胚、子叶柄、下胚轴、 茎、叶等。器官培养主要用于器官分化、形态建成、物质代 谢以及细胞遗传、病毒学等方面的研究。

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外植体CExplantD 组织培养中作为离体培养材料的 器官、组织的片段或细胞。如叶、根、茎、胚、幼胚、子叶、 胚轴、花药等。在继代培养时,将培养的组织切段移入新的 培养基时,这种切段也称外植体。外植体供体植株和外植体 本身的生理生化状态差异主要由供体植株的年龄、发育阶 段、生长环境和外植体取材的位置等引起的。营养繁殖的能 力与幼态因素相关。一般材料越年幼,营养繁殖越容易。幼 态组织比老态组织具有较高的形态建成能力(特别是生根 能力),如幼叶不定芽再生能力比成熟叶要高。

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未成熟胚培养Clmmature embryo cultured 茶树离体 的未成熟胚在培养基上培养成株的方法。于7?8月间将未 成熟茶果,剥去果皮后的乳白色或浅棕色种子,经消毒处 理,剥开外种皮,取出珠孔端的未成熟胚(粒径约1?3毫 米),在无菌条件下,接种到含有适当营养成分的培养基上, 并放入适宜的恒温室(器)内,观察其诱导与分化情况。该 项研究由中国农业科学院茶叶研究所于1986年率先进行, 提出了茶树未成熟胚离体培养成苗的培养基、培养条件和 试管苗的移植技术,从供诱导的10多个品种中,成功地培 养出

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叶片培养CBlade cultured 茶树离体叶片在培养基中 成株的方法。取嫩叶,经表面消毒,在无菌操作条件下,将 近叶柄部位的叶片接种至培养基上,诱导其分化和生长。 1989年刘德华等最先从茶树叶片愈伤组织诱导出芽,初步 建立了一套叶片愈伤组织形成、植株再生的程序。茶树叶柄 具有较强的芽、胚状体、胚性细胞团分化的能力,可直接诱 导形成芽,或经脱分化增殖形成愈伤组织,再由愈伤组织分 化出胚状体,进而形成芽和完整植株。茶树叶片培养不仅可 用于研究形态建成、光合作用、叶绿素形成等理论问题,而 且可快速繁殖种

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愈伤组织培养〔Callus culture〕使植物各种器官或组 织增殖形成薄壁细胞团的过程。是组织培养的基础。从完整 植株分离而来的外植体不再受整体的控制,在一定的生长 调节物质的作用下,供给适量的营养物质,是诱发愈伤组织 的决定因素。其发生过程是:外植体中的活细胞经诱导而脱 分化,恢复其潜在的全能性,转变为分生细胞,继而其衍生 的细胞分化为薄壁组织而形成愈伤组织。一般叶片基部容 易诱导愈伤组织,茎切段的愈伤组织多出现在两端切口处。 愈伤组织的细胞一般作为细胞培养的起始材料,在理论研 究上可以证明植物细胞

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细胞悬浮培养CSuspension culture of plants 将分散 的离体植物细胞或小的细胞团块悬浮在液体培养基中进行 生长的技术。可用于生产、提取某些有用成分和次生物质, 单细胞培养还可用于取得单细胞无性系,进行突变体选育。 通常以组织结构较疏松的愈伤组织作为起始材料,使其在 摇动的液体培养基中呈单细胞或小的细胞团块,也有用无 菌的试材经匀浆后的细胞悬浮液进行培养。可以大量提供 均匀的、形态上和生理上比较一致的细胞,在细胞水平上研 究茶树的理化特性,且细胞增殖较快,适合于大规模培养。 一般说

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微体繁殖CMicropropagation^ 亦称“快速繁殖"。在 无菌条件下,利用植物体的一部分,在人工控制的营养和环 境条件下繁殖植物的方法。是常规无性繁殖方式的一种扩 展和延伸,保持了常规方法的特点,且具有四个优点:①使 用的植物材料极少,只需要少量的茎尖、叶片、茎切段或其 他器官即能在试管中建立起反复增殖的系统。②繁殖周期 短,繁殖系数高。③不受季节和气候条件的影响进行周年生 产。④由于在无菌条件下进行,在繁殖过程中不受病虫的侵 害,植株为无菌苗,可不受检疫等限制,亦可进行国际间的 种质交换。国际

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快速繁殖CRapid propagation^ 即“微体繁殖

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继代培养〔Subculture〕 植物的组织、器官或细胞在 培养基(或培养液)上生长一段时间以后转移到新的培养基 上继续培养的过程。茶树外植体的最初培养称为初代培养, 将初代培养获得的培养体移植到新鲜的培养基中,固体培 养时,每隔4?6周需进行一次继代培养。在组织块较小的 情况下,继代培养时可将整块组织转移过去。若组织块较 大,可先将组织分成几个小块再接种。长期不进行继代培养 的组织常常由于培养基营养物质的逐渐枯竭,以及代谢产 物的累积,可对组织起毒害作用,如茶树愈伤组织的褐化现 象即往往由此而引起。继代

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初代培养〔Primary cultured 见"继代培养”。

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种质〔Germplasm〕 亦称“生殖质"。亲代通过生殖 细胞或体细胞传递给子代的遗传物质。由它派生出体细胞, 其遗传物质保持不变,也不受树体或环境的影响。

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生殖质〔Reproductive plasm〕 即“种质

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种质保存CGermplasm conservation^ 利用天然或人 工的适宜环境,以动态繁衍或静态贮藏的方法对种质资源 进行的保存。目的是使之具有遗传完整性和高的发芽力或 生活力,并通过繁殖能将其遗传性传递下去,并在繁殖前后 具有最大程度的遗传相似性。20世纪90年代茶树种质保 持的方法有:①建圃保存,即在不同地区、不同生态条件下 建立各种类型的资源圃。②室内保存,包括茶籽、花粉、营 养体冷藏和组织培养物继代培养等。

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液氮贮藏法〔Liquid nitrogen preservation D 亦称 “超低温贮藏法”。用液态氮冷冻贮藏植物种质资源的方法。 利用液氮液相为一196C的低温,将茶树冷冻保存材料(种 子、花粉、愈伤组织、茎尖、悬浮培养细胞等),经预处理 后,采用慢冻法、快冻法、预冻法、干冻法,投入液氮罐内 进行贮藏。取出时,采用快速化冻(在38?40°C或在温水 浴中化冻)、慢速化冻(0C、2?3C室温下化冻)。茶树材 料在液氮中,几乎所有的细胞代谢活动和生长过程等都停 止,排除遗传性状的变异,同时保存细胞的活力

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超低温贮藏法 CUltra-low temperature preservation〕

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胚状体〔Embryoid〕 在离体植物细胞、组织或器官 培养过程中,由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过 程形成的与合子胚相类似的结构。能进一步再生成整体植 株。在组织培养条件下产生的非合子胚有别于自然发生的 珠心胚。茶树体上具有产生胚状体能力的部位十分广泛,离 体培养的叶、茎、花药、子叶、下胚轴、未成熟胚、胚等都 能直接产生或通过诱导愈伤组织再分化为胚状体。胚状体 分化后的发育过程为球形胚f心形胚f鱼雷形胚f成熟 胚。胚状体产生的方式有:直接由器官上发生;培养物先形 成愈伤组织,由愈伤组织再分化形成胚

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